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透明质酸酶(9001-54-1)的中试大生产工艺;技术转让、技术求购 透明质酸酶(9001-54-1)
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CAS:9001-54-1

透明质酸酶 我有技术 | 我要技术

CAS:9001-54-1英文名Hyaluronidase
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透明质酸酶
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分子式 C18H14O7 分子量 342.29956
退税率 海关编码
是否需要商检 HS查询 是否危险品 CHEMBLINK   |   SIGMA
别名(英文) 别名(中文) 玻璃酸酶;动物糖醛酸酶;粘蛋白酶;粘朊酶;玻璃酸酯;玻璃糖醛酸酶;玻璃样酸酶
外观物理性质 储存条件
用途
备注信息

物理化学性质

外观性状 一种白色或微黄色粉末
溶解性 在水中易溶,在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。无臭。
稳定性较好,420C持续加热60min活力不损失,1000C 持续加热5 min活力可保留80%。在低浓度的水溶液中较易失活,一般可用明胶或阿拉伯胶保护防止失活。Fe2+、Cu2+离子对酶有可逆抑制作用。Pb2+、Hg2+、Ni 2+、等离子对酶活性没有明显影响。在氯化钠(0.15mol/L)或硫酸鱼精蛋白的存在下,硫酸软骨素B(皮肤素)、硫酸类肝素、硫酸角质素、肝素钠及高浓度玻璃酸对玻璃酸酶的抑制作用可被逆转。玻璃酸酶注射液为玻璃酸酶加适宜的赋形剂,经冷冻干燥的无菌制品,为白色或类白色的冻干块状物或粉末。水溶液不稳定,需临用前配制。

透明质酸酶作用

用途 玻璃酸酶可作为蛋分分解酶。一般可用来加速肌肉、皮下注射药液的吸收,减轻注射部位疼痛,促进局麻药的浸润,有利于促进手术及创伤后局部水肿或血肿的消散。也可用于肠粘连。但是水杨酸类能抑制玻璃酸酶的作用。不能静脉注射。用前先做皮试,以免出现过敏反应。感染及肿痛部位禁用,以防引起扩散。小鼠皮下注射LD50>25万单位/kg;小鼠肌肉注射LD50>1.25万单位/kg。
皮下或肌肉注射,150~1500U/次,1日1~2次,先用生理盐水或注射用水溶解,再与其他注射剂混合使用;皮下输液,100ml大输液中加本品150U。
用途 该品为抗高血压药。小鼠口服LD50为122ml/kg,大鼠LD50为90ml/kg。
生产方法 由1-氯代酞嗪(见9720)经肼化而将1-氯代酞嗪加到水合肼中,在87-89℃搅拌回流12h,趁热过滤。滤液冷却结晶,过滤,得肼酞嗪。肼酞嗪用15%相加酸溶解成盐,再加乙醇使结晶析出,可得肼酞嗪盐酸盐。

透明质酸酶制备方法

方法一、牛羊睾丸提取法

切碎、提取将冻冻或新鲜羊睾丸洗净,剥除内外层及副睾丸,切碎,用绞肉机绞成糜浆,称取100kg,倒入预先配好的乙酸溶液(水90L、冰醋酸0.6L、1mol/L盐酸10L 混合而成)中,在-50以下的冻库中,每隔15min用力搅拌3~5min,使之充分提取4h,然后进行扯浆,得浆液约125~140L。浆渣备第2次提取玻璃酸酶用。
羊睾丸Hac;HCl;-50→提取提取液
盐析、吊滤取第一次浆液,在不断搅拌下每升浆液中加入硫酸铵(工业用)210g。使之安全溶解,静止1h后,转入双层用涤纶袋吊滤,反复两次。次日得澄清滤液,在不断搅拌下每升加入硫酸铵290g。使之完全溶解,静止1h 后,用涤纶袋吊滤,过夜,次日拆袋,得粗制品。
提取液(NH42SO4→盐析;吊滤粗品
盐析、透析取精品溶于5L的冰冷蒸馏水中,缓缓加入硫酸铵固体125g,并不断搅拌,使之完全溶解,于冷库中静置过夜,次日除去液面油脂,用胶管虹吸中层清液,用布氏漏斗过滤,上层和底层沉淀最后用布氏漏斗过滤,合并滤液。在滤液中缓缓加入750g硫酸铵,充分搅拌,待完全溶解后,于冷库中放置过夜。次日,弃去上层清液(如上层溶液浑浊不清,可在冷库中放置3~5d ,待上层溶液变清)得盐析沉淀物,再溶于0.5L冰蒸馏水中,进行透析,每袋约100ml,放在pH6.5的磷酸盐-枸橼酸缓冲液[枸橼酸7.5g、磷酸氢二钠(12个结晶水)62g、氯化钠70g加水配制成2500ml,用枸橼调整pH6.5]2500ml中,于冷库透析24h,得透析液。酶活力约250000U/ml。
粗品(NH4)2so4;磷酸盐-枸橼酸→pH6.5;盐析;透析透析液
去热原、干燥将透析液离心分离,离心液置于冰冷的水溶中,加入Na3PO4·12H2O(150g/L即15%)溶液50ml, 缓缓加入乙酸钙(200g/L即20%)30ml,并不断搅拌。随后用氢氧化钠(0.5mol/L)调节pH至8.5,继续搅拌10min,4号垂熔玻璃漏斗过滤(滤并瓶放在冰水浴中),滤液用盐酸( 0.5mol/L)中和pH为7,冷冻干燥,得酶精制品。
透析液Na3PO4;Ca(Ac)2; pH8.5→去热原精制品HCl;pH7→干燥干精制品
冻干制剂取一定量精制品溶于5%的明胶注射用水溶液中,用氢氧化钠调节pH5~7,除菌,过滤,分装,每瓶0.5ml, 冷冻干燥,即得注射用玻璃酸酶制剂,每瓶含玻璃酸酶100或150U,按睾丸质量计算收率约为20000U/kg。
干精制品5%水解明胶;pH6→制剂冻干制剂成品

方法二微生物发酵法

培养、发酵培养基;
淀粉1份;棉子饼1份;谷胱粉1份;
干酵母1份;磷酸氢二钾0.1份链霉菌;300C;3d→发酵发酵液
消泡剂0.4%
沉淀、分离 发酵液→浓缩液丙酮→沉淀粗品色谱柱→分离精制品
冷冻、干燥 精制品5%水解明胶→冷冻干燥冻干制剂成品

透明质酸酶作用与用途

为一种能水解透明质酸的酶(透明质酸为组织基质中具有限制水分及其它细胞外物质扩散作用的成分),用于人体能暂时降低细胞间质的粘性,可促使皮下输液、局部积贮的渗出液或血液加快扩散而利于吸收,为一种重要的药物扩散剂。临床用作药物渗透剂,促进药物的吸收,促进手术及创伤后局部水肿或血肿消散。

透明质酸酶剂量与用法

常用量60U~160U溶于生理盐水,配成每ml含0.7U、1.5U或2.0U的注射液,事先注射于灌注部位。
4副反应、皮试及禁忌症

1、副反应罕见,少于1/1000的患者报告荨麻疹或血管水肿;
2、对于任何透明质酸酶产品,使用前均建议做皮试;
3、过敏者忌用,对蜂毒过敏者忌用;
4、与呋塞米、肾上腺素、苯二氮卓类、肝素、苯妥英药性不兼容;
5、水杨酸酯、可的松、雌激素、促皮质素、抗组安剂可部分削弱透明质酸酶的酶促作用;
6、不可用于消肿(咬伤、刺伤);
7、不可用于增进多巴胺或抗抑郁(alpha-agonist)药物的吸收;
8、不可用于感染或炎症及周边部位注射(可能促进感染扩散);
9、眼部恶性肿瘤患者禁用;
10、孕妇忌用

透明质酸酶生态学数据

对水是稍微有危害的不要让未稀释或大量的产品接触地下水、水道或者污水系统,若无政府许可,勿将材料排入周围环境

透明质酸酶性质与稳定性

常规情况下不会分解,没有危险反映

透明质酸酶贮存方法

密封、阴凉、干燥保存

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